氨基酸類藥物一般可做成水針、粉針以及氯化鈉/葡萄糖大輸液等制劑。其葡萄糖大輸液制劑由于使用等滲調(diào)節(jié)劑葡萄糖，在加熱或長期放置過程中能形成5-羥甲基糖醛（5-HMF）和5-羥甲基糠醛聚合物，5-HMF也可進(jìn)一步與氨基酸形成加合物；另外氨基酸類藥物還可以和葡萄糖發(fā)生Maillard反應(yīng)，形成一系列復(fù)雜的加合物；而5-HMF及各種加合物皆有一定的毒性，因而氨基酸類藥物制成葡萄糖注射液時(shí)應(yīng)嚴(yán)格控制溶液中的5-HMF及各種加合物等雜質(zhì)的量，以確保臨床用藥的安全性。
　　選擇適宜的檢測方法
　　由于在生產(chǎn)放置過程中，加合物皆可能有所增加，出于安全性的考慮，氨基酸葡萄糖注射液的質(zhì)量研究和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中應(yīng)增加多項(xiàng)檢查，通過終點(diǎn)控制使該類注射液中加合物的量控制在一定范圍內(nèi)以保證臨床用藥的安全性。
　　對于如何測定加合物，目前尚無統(tǒng)一的檢測和質(zhì)量控制的方法，可以通過顏色檢查法和HPLC等方法對其進(jìn)行檢測。
　　■顏色檢查法較為粗略
　　多數(shù)氨基酸（色氨酸、苯丙氨酸等少數(shù)氨基酸除外）由于結(jié)構(gòu)中含有的發(fā)色團(tuán)較少，因而紫外吸收皆較弱；葡萄糖為多羥基醛結(jié)構(gòu)，紫外吸收也較小。而葡萄糖產(chǎn)生的雜質(zhì)5-HMF、5-HMF的聚合物、5-HMF與氨基酸形成的加合物、Maillard反應(yīng)產(chǎn)物分子中皆有較大的共軛結(jié)構(gòu)，在遠(yuǎn)紫外區(qū)（400納米附近）皆有一定的紫外吸收，因而可以通過控制溶液的顏色來初步控制加合物的總量。目前，常用的顏色檢查有比色法和測定吸光度法。
　　比色法適用于在可見光區(qū)有一定吸收（即肉眼可見有一定的顏色）的注射液的顏色檢查。由于氨基酸類藥物的葡萄糖注射液一般可見一定的顏色，因而可采用比色法通過控制注射液的顏色來初步控制加合物的量，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中一般應(yīng)包括溶液顏色的檢查，限度一般定為不超過黃色1號或2號標(biāo)準(zhǔn)比色液。
　　測定吸光度的方法適用于在可見光區(qū)無吸收（肉眼看不到顏色）但在紫外區(qū)有吸收的注射液的顏色檢查。5-HMF在可見光區(qū)無吸收，但在284納米有最大吸收，因而中國藥典通常采用吸光度檢查法在284納米測吸光度來控制葡萄糖大輸液中5-HMF的量。部分Maillard反應(yīng)產(chǎn)物也僅有紫外吸收，而在可見光區(qū)無吸收，故采用吸光度檢查法在紫外區(qū)測定吸光度也可粗略控制溶液中加合物的量。
　　值得注意的是，控制溶液的顏色雖是控制加合物等雜質(zhì)的重要的、有效的手段，但其對雜質(zhì)的控制力度是有限的。由于5-HMF及部分加合物只有紫外吸收，在可見光區(qū)無吸收，因而溶液的顏色與溶液中的5-HMF/加合物的量并沒有很好的相關(guān)關(guān)系。如，葡萄糖大輸液的顏色可能已超過標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，但溶液中5-HMF的量，即在284納米處的吸光度可能仍符合標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定。另外，由于不同加合物在紫外區(qū)的最大吸收波長可能不一致，因而測定吸收度的方法也有一定的局限性。
　　在實(shí)際的氨基酸葡萄糖注射液的質(zhì)量研究及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中，通常在檢查溶液顏色（比色法）的同時(shí)，在284納米或其他波長處（如440納米）測定溶液的吸光度，二者相結(jié)合能好地控制產(chǎn)品的質(zhì)量。
　　■HPLC法更精確
　　檢測溶液的顏色對雜質(zhì)的控制是粗略的，且無法控制溶液中的單加合物的量。高效的相色譜（HPLC）法是一種控制5-HMF及各種加合物更為精確的方法，。
　　5-HMF及各種加合物皆有較好的紫外/可見吸收，采用普通的紫外/可見檢測器即可對這些雜質(zhì)進(jìn)行檢測；而氨基酸和葡萄糖的紫外吸收皆較弱，在測定波長一般對這些雜質(zhì)的測定不會產(chǎn)生干擾，因而可采用普通HPLC-UV/VIS法來定量控制5-HMF及各種加合物的量。中國藥典2005年版葛根素葡萄糖注射液即采用普通HPLC法，用外標(biāo)法在284納米處測定來定量控制5-HMF的量。根據(jù)同樣的原理，該方法也可以用來定量控制氨基酸葡萄糖注射液中的5-HMF、5-HMF的聚合物、Maillard反應(yīng)產(chǎn)物。
　　由于加合物的種類較為復(fù)雜，因而在進(jìn)行檢查時(shí)應(yīng)進(jìn)行較為詳細(xì)的方法學(xué)試驗(yàn)研究：可以先采用劇烈的條件（如提高溶液中氨基酸和葡萄糖的濃度、長時(shí)間加熱等）加速各種加合物生成，然后對含有較大量加合物的溶液進(jìn)行線性、分離度、檢測限方法學(xué)研究和方法學(xué)驗(yàn)證以確定方法的可行性。
　　采用該方法色譜條件的確定一般依據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，如波長的選擇。由于不同的氨基酸可以與葡萄糖形成不同的加合物，而且加合物可能有多種，而不同的加合物有不同的紫外吸收，應(yīng)根據(jù)試驗(yàn)測定的結(jié)果來確定波長，必要采用二極管陣列檢測器來確定合適的波長。實(shí)際的檢測中，較常使用的檢測波長一般在260~400納米左右。
　　由于氨基酸等主藥在該色譜條件下沒有吸收峰，因而不能采用主成分自身對照法，而需要選用一個(gè)合適的參比物進(jìn)行折算。由于葡萄糖大輸液中會產(chǎn)生5-HMF，其最大吸收波長在280納米左右，較為合適，因而可選用5-HMF作為參比物。注射液中5-HMF量的計(jì)算可采用外標(biāo)法；其他加合物量的計(jì)算，由于加合反應(yīng)歷程較為復(fù)雜，且不同的氨基酸生成的加合物的種類和量也不盡相同，無法一一精確定量，可以與5-HMF相比，以5-HMF為參比物進(jìn)行折算。
　　關(guān)于氨基酸葡萄糖注射液中加合物的限度，目前尚未統(tǒng)一，可參考中國藥典中葡萄糖大輸液中對5-HMF所定的限度：1%葡萄糖注射液在284納米處吸光度不得超過0.32。該吸光度限度與溶液中5-HMF的量有一定的相關(guān)關(guān)系，目前較為公認(rèn)的折算關(guān)系為：中國藥典中“1%葡萄糖注射液在284納米處吸光度不得過0.32”的限度，約相當(dāng)于1%葡萄糖注射液中5-HMF的量在2~3微克/毫升左右，或相當(dāng)于5%葡萄糖注射液中5-HMF的量在10~15微克/毫升左右。
　　參考該限度以及中國藥典2005年版葛根素葡萄糖注射液中5-HMF的限度，氨基酸葡萄糖注射液中5-HMF和加合物的限度可定為：以5-HMF作為外標(biāo)物，氨基酸葡萄糖注射液（葡萄糖濃度為5%）中5-HMF的量一般不得過10微克/毫升，其他加合物的量以5-HMF計(jì)，雜質(zhì)總量（包含5-HMF）一般不應(yīng)超過20~30微克/毫升（不同的氨基酸限度可能會略有差別）。
　　四項(xiàng)措施減少5-HMF和加合物
　　■控制溶液pH值
　　實(shí)驗(yàn)研究表明，堿性條件和強(qiáng)酸性條件皆可加速5-HMF的形成及Maillard反應(yīng)的進(jìn)行，因此控制溶液的pH值非常重要。一般情況下，溶液的pH值應(yīng)該控制在3.5~5.0之間。但是，由于不同的氨基酸葡萄糖注射液的最佳的pH值可能不盡相同，因而應(yīng)進(jìn)行具體的實(shí)驗(yàn)，并根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果來確定最佳的pH值范圍。
　　■控制滅菌后溫度
　　高溫條件可加速5-HMF及各種Maillard反應(yīng)產(chǎn)物的產(chǎn)生，但葡萄糖大輸液必須進(jìn)行高溫滅菌以保證產(chǎn)品的安全性，所以必須選用合適的工藝條件進(jìn)行滅菌`。
　　大輸液常規(guī)的滅菌條件一般采用121℃滅菌15分鐘以上或115℃滅菌30分鐘以上的工藝條件。在實(shí)際生產(chǎn)中，某些單位以高溫條件下可加劇加合物的產(chǎn)生為由而采用100℃或105℃滅菌，這樣的條件不能保證滅菌的徹底性。
　　解決此矛盾的方法為：熱壓滅菌后應(yīng)采取適當(dāng)?shù)睦鋮s和通風(fēng)措施，盡快使溶液散熱降溫。如采用滅菌后迅速通風(fēng)，同時(shí)采用內(nèi)噴淋降溫法使溫度迅速降至60℃以下。此法可大大降低注射液中5-HMF和Maillard反應(yīng)產(chǎn)物的量。
　　■加入反應(yīng)抑制劑
　　在該類注射液的處方中加入適量的Maillard反應(yīng)抑制劑也不失為一個(gè)有效的方法。目前，常用的Maillard抑制劑為亞硫酸鹽，亞硫酸鹽可以與葡萄糖的羰基發(fā)生可逆性的加成反應(yīng)，阻止Maillard反應(yīng)的進(jìn)一步發(fā)生。此外，亞硫酸鹽還能產(chǎn)生還原作用，阻止和減緩某些中間反應(yīng)的發(fā)生。亞硫酸鈉和亞硫酸氫鈉等是目前較常用的Maillard反應(yīng)抑制劑。
　　■降低成品的貯藏溫度
　　除上述措施外，還可通過降低成品貯藏溫度的方法減少加合物的產(chǎn)生。相關(guān)的穩(wěn)定性研究表明，氨基酸葡萄糖注射液在加速試驗(yàn)和室溫長期旋轉(zhuǎn)試驗(yàn)過程中，5-HMF和各種加合物有增加的趨勢。有文獻(xiàn)研究表明，Maillard反應(yīng)在30℃以上反應(yīng)較快，在20℃以下較慢，因而可以降低產(chǎn)品的貯藏溫度，如采用20℃以下的保存條件，以保證產(chǎn)品的質(zhì)量。